冰川表层雪样中微生物总DNA几种提取方法的比较研究

日期:2019.12.16 阅读数:45

【类型】期刊

【作者】闫沛迎,侯书贵,陈拓,张淑红,孙维君(中国科学院寒区旱区环境与工程研究所冰冻圈科学国家重点实验室;南京大学地理与海洋科学学院;商丘师范学院生命科学系)

【作者单位】中国科学院寒区旱区环境与工程研究所冰冻圈科学国家重点实验室;南京大学地理与海洋科学学院;商丘师范学院生命科学系

【刊名】冰川冻土

【关键词】 冰川表层雪;微生物总DNA;方法优化

【资助项】国家自然科学基金项目  (40825017;40576001;31100369)

【ISSN号】1000-0240

【页码】P478-484

【年份】2019

【期号】第2期

【期刊卷】1;|7;|8;|2

【摘要】通过对4种具有不同裂解方式的微生物总DNA提取方法的比较,筛选出较佳的方法进行滤膜处理、DNA抽提及沉淀的优化,再将优化出的传统DNA提取方法与商业化试剂盒提取方法比较.结果表明:商业化试剂盒提取总DNA的方法适用于冰川表层雪微生物总DNA的提取;其次,将滤膜剪碎,用溶菌酶(5mg.mL-1)+蛋白酶K(1mg.mL-1)+CTAB(1%)+SDS(1%)的裂解方式,氯仿:异戊醇(24∶1)抽提一次,乙醇沉淀DNA的提取方法是一种效果较佳且廉价的冰川表层雪微生物总DNA提取方法.

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