薄层色谱鉴别法对中药材、中成药中活性成分的定性研究具有专属性强、快速分离、快速鉴定的特点[1]，能够直观反映药材或制剂的质量，在中药药品质量标准中被广泛应用。冰川滴丸是由姜黄、川芎等药组成，具有祛瘀止痛的作用，主治冠心病、心绞痛，是长春中医药大学附属医院临床医生多年经验方，为方便患者服用，更好发挥药物性能，对其进行了工艺改进，制成滴丸剂型。为控制药品质量，本实验对姜黄、川芎、桂枝进行了薄层色谱鉴别。

1 仪器与材料

制剂冰川滴丸由长春中医药大学附属医院提供。标准品：姜黄素、去甲氧基姜黄素、双去甲氧基姜黄素、桂皮醛、肉桂酸、藁本内酯、欧当归内酯A、姜黄对照药材、川芎对照药材、桂枝对照药材均购自中国药品生物制品检定院。试剂均为分析纯，薄层色谱板为青岛海洋化工厂、青岛基亿达硅胶试剂有限公司。

2 实验方法与结果

2.1 姜黄

取本品0.5g，研细，加无水乙醇30mL，超声处理30min，滤过，滤液浓缩至约5mL，上清液作为供试品溶液[2～3]。另取姜黄对照药材0.2g，同法制成对照药材溶液。再取姜黄素对照品、去甲氧基姜黄素对照品、双去甲氧基姜黄素对照品适量，分别加无水乙醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液[4]。同时按照处方和制法，制成不含姜黄的阴性供试品，再按供试品溶液制备方法制成阴性对照液。参照中国药典[5]现行版附录中薄层色谱法的操作方法试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、三种对照品溶液、阴性对照液各2μL，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-甲醇-甲酸(96:4:0.7)为展开剂，预饱和20min，展开，取出，晾干，分别置日光和紫外光灯(365nm)下检视。结果显示：供试品色谱中，在与对照药材色谱、各对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点或荧光斑点。见图1。

2.2 川芎

取本品0.5g，研细，加乙醚15mL，超声处理10min，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷 5mL使溶解，上清液作为供试品溶液[6～8]。另取川芎对照药材2g，按照上述方法制成对照药材溶液。再取藁本内酯对照品、欧当归内酯A对照品，分别置棕色量瓶中，加乙酸乙酯制成每1mL含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。同法制成阴性对照溶液。吸取上述五种溶液各2μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯（3:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。供试品色谱中，在与对照药材色谱、对照品色谱相应的位置上，显相同的荧光主斑点。见图2。

2.3 桂枝

取本品0.5g，研细，加乙醚15mL，超声处理10min，滤过，滤液蒸干，残渣加三氯甲烷5mL使溶解，上清液作为供试品溶液[9，10]。另取桂枝对照药材0.5g，同法制成对照药材溶液。再取桂皮醛对照品，加乙醇制成每1mL含1μL的溶液，取肉桂酸对照品加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液，作为对照品溶液[4]。按照处方和制法，制成不含桂枝的阴性对照样品，同供试品溶液制备方法制成阴性对照液。吸取供试品溶液、阴性对照液各1μL、对照品溶液各2μL、对照药材溶液5μL，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以正己烷-三氯甲烷-乙醚-冰醋酸（5:3:1:0.4）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（254nm）下检视。层析结果表明供试品色谱在与对照药材色谱和对照品色谱相应的位置上，分别有相同颜色的斑点。见图3。

3 讨论

3.1 薄层鉴别方法学考察

薄层鉴别方法是中药质量检验直观、便捷的手段之一，其重现性决定了建立的薄层条件是否列入制剂质量标准正文，重现性的影响因素有温度、湿度、薄层板、点样方式等。按照中国药典质量标准方法学考察有关规定，纳入质量标准正文的薄层鉴别须对上述影响因素做耐用性考察，本实验重点考察了T40℃、T4-10℃、RH85%以上、不同厂家薄层板、带状或点状点样方式等[11]，实验表明，薄层展开条件稳定，可纳入质量标准正文用于控制质量。

3.2 各药材对照品的选择

处方中有姜黄、川芎、桂枝三味药，中国药典[9]中对姜黄的鉴别以姜黄素、桂枝以桂皮醛、川芎以欧当归内酯A为对照品进行实验，经查阅相关文献[12]，姜黄的活性成分还有去甲氧基姜黄素及双去甲氧基姜黄素，桂枝中有肉桂酸、川芎中的藁本内酯等，本实验中增加了上述对照品进行检验，对制剂质量控制更完善。在川芎预实验中，采用高效液相色谱法对制剂中阿魏酸、川芎嗪、绿原酸三种物质进行检测，其含量甚少或检测不出，因此川芎薄层色谱鉴别预实验时，没有对上述三种物质进行研究。

参考文献

[1]向金莲,王伟,任飞宇.薄层色谱技术在中药检验中的应用[J]，中国医药指南,2018,16(11):237～238.

[2]万红才,段萍,徐作刚，等.金乌骨通胶囊中姜黄薄层色谱鉴别方法改进[J].医药导报,2015,34(02):261～262.

[3]陈玲珑,田其学,吴劲松，等.复方消炎散中冰片和姜黄的薄层色谱鉴别[J].湖南中医杂志,2013,29(06):124～128.

[4]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015年版一部.中国医药科技出版社，2015.

[5]国家药典委员会.中华人民共和国药典2015年版四部.中国医药科技出版社，2015.

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[9]袁祥慧,杨帆,杨惠莲，等.五苓片中桂枝、茯苓的薄层色谱鉴别[J].海峡药学,2010,22(06):59～60.

[10]梁璐.桂枝的药理作用分析及其临床应用研究[J].中国医药指南,2016,14(25):190～191.

[11]单红艳.薄层色谱法检验中药应注意的问题[J].中国中医药现代远程教育,2011,9(17):146～147.

[12]杨海玲,吴丽丹,刘慧兰，等.一测多评法同时测定姜黄-桂枝药对不同配伍比例中5种有效化学成分含量[J].中国医院药学杂志,2017,37(21):21422146.